پاورپوینت تشخیص مولکولی لاکتوباسیلوس روتری (Molecular diagnosis of L. reuteri)

قسمتی از متن:

تکنیک رییل تایم در واقع نقطه برخورد ابداعات جدید در زمینه ترموسایکلر ، انواع تغییرات در پرایمرها و مخلوط کردن روشهای هیبریدیزاسیون با تکنیکهای آمپلیفکاسیون می باشد و در واقع نسل جدیدی از ترموسایکلرها با سیستم فلورومتری این اواخر ارائه شده که اجاره مونیتور کردن پیوسته خاصیت فلوئورسانس محصول PCR در زمان جمع شدن را می دهد . در این سیستم ها از کاوشگرها یا پروپهای هیبریدیزاسیون مارک دار شده با رنگهای فلوئورسانس در انتهای 5 یا 3 استفاده می شود که امکان مونیتورینگ پیوسته محصول PCR را بدون جداسازی آنها در روشهائی همچون الکتروفورز در ژل آگاروز با ژل پلی آکریل آمید , می دهد .افزایش سیستم های رییل تایم مربوط می شود به :

کاهش زمان سیکل های PCR

حذف مرحله Post – PCR

کاربرد مارک های فلوروژنیک و روش های حساس آشکارسازی تابش آن ها

از معایب سیستم های رییل تایم نسبت به روشهای متواثر PCR می توان اشاره نمود به :

عدم توانایی در مشخص کردن اندازه محصول بدون باز کردن سیستم

ناسازگار بودن برخی پلات فورمها با شیمی برخی رنگ های فلوروژنیک

بطور نسبی توانایی محدود کاربرد روش مالتیپلکس .

در روشهای رییل تایم نیازی به دستکاری بعد از مرحله تکثیر آمپلیکون نمی باشد . بنابراین ، این روشهای سنجش تحت عنوان روشهای بسته یا سیستم های هووموژن مشهور گردیده اند . از مزایای سیستم های هوموژن به حداقل رسیدن آلودگی به عنوان آفت اصلی روشهای تکثیری و توانایی انجام دقیق سنجش می باشد .

فهرست مطالب:

مقدمه

تاریخچه

کلیات

روشهای سنتی PCR

تکتیک رییل تایم

ریزآرایه ی DNA و تراشه زنی

اصول آزمون

بیشینه تحقیق

منابع